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通过利用包括现代生物技术在内的方法将实验室研究为临床应用的产品与技术，同时通过临床的观察与分析帮助实验室更好的认识人体与肿瘤、进行更优化的实验设计来促进基础研究，从而最终实现整体医疗水平的提高、帮助患者解决肿瘤相关的健康问题。 2015年3月11日 讯 /生物谷BIOON/ --NfkB是一类十分重要的因子，它参与调节了细胞的炎症反应，免疫应答，细胞增殖、分化以及存活等许多方面。同时，研究也发现在许多种的癌症微中NF-kB的非正常表达能够引起炎症反应，从而促进癌症的扩散与侵染，这说明NF-kB是联系炎症反应与癌症的关键。目前有许多NF-kB的负向调节因子都被认为可能具有肿瘤恶化的潜力。 长非编码RNA（lncRNA）是一类包含大量的RNA家族。这一类RNA长度超过200bp，不具有翻译成蛋白质的能力，因此得名。虽然不具有传统RNA的功能，但lncRNA被发现具有许多调节因子活性的能力。而且许多研究证明有些lncRNA在肿瘤增殖，凋亡，扩散以及稳态维持方面具有重要的功能。最近，中山大学中山纪念医院乳腺癌研究中心的song erwei在Cell子刊《cancer cell》上发表了关于lncRNA调节NF-kB活性进而控制乳腺癌扩散的机制。首先，作者利用乳腺癌细胞系MDA-MB-231作为研究对象分析了在TNF-a或IL-1b刺激下组的变化。结果显示，在炎性因子刺激下，有23种lncRNA发生了上调，28种发生了下调。其中包括一种叫做NKILA的lncRNA。通过PCR的方式，作者鉴定出了NKILA是一个长度为2570nt的本。作者利用免疫原位杂交的手段发现NKILA主要定位于胞质中。之后，作者通过加入NF-kB入核的剂Sc-3060或JSH-23来阻断NF-kB的活性，结果显示NF-kB的失活了NKILA的上调。作者通过结合突变与染色质免疫共沉淀的手段证明了NF-kB可以作用于NKILA编码区上游的顺式调控区域。这一结果说明炎性刺激引起的NKILA上调依赖于NF-kB的活性。之后，作者通过实验发现NKILA的表达量在低扩散性的细胞系中药远高于在高扩散性的细胞系中。由于NF-kB能够正向促进肿瘤的扩散，作者希望了解NKILA是否与NF-kB的活性存在反馈的作用。作者通过人为乳腺癌细胞中NKILA的表达水平，发现能够提高NF-kB的表达量以及入核的效率。以上实验说明NKILA是NF-KB的负向调节因子。进一步，作者通过体外的生化试验与荧光成像实验证明NKILA能够Ikb在静息状态与激活状态下磷酸化与降解。而这一功能依赖于它与p65-p50-IkB的相互作用。之后，作者通过一系列突变与生化实验找到了NKILA与IKB复合体相互作用的关键位点：两个RNA发卡结构。其中一个与NK-kB的DNA结合位点十分相近。最后，作者通过体外与体内的功能学检测分别证明了NKILA对于促进肿瘤细胞发生凋亡以及肿瘤扩散的能力，并能够显著延长患癌小鼠的存活时间。（生物谷） |