SK-OV-3(卵巢癌)基本特性: (1)原代细胞培养末期液氮冻存。 (2)每冻存管细胞数:5×105 cells/1ml。 (3)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 (4)代数:2-4代。 (5)用途:只可用于科研。 对于贴壁生长的SK-OV-3(卵巢癌)细胞,相对来说比较简单但很麻烦。以下主要讨论贴壁生长的细胞。 在讨论之前,大家首先要有一个概念,即洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米,沉降菌数不得超过1个每培养皿。而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。所以在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。 所以处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量! 1)将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。 2)继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。 3)继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。 4)重复步骤3再洗。 5)重复步骤3再洗。 6)加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 7)加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 8)再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9)加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。 磷酸化荷尔蒙脂肪酶 HRAS样因子3 羟基类固醇脱氢酶111 羟基类固醇脱氢酶112 羟类固醇脱氢酶17 羟类固醇脱氢酶172 羟类固醇脱氢酶173 羟基类固醇脱氢酶3 层细胞抗原 层细胞抗原37 热休克蛋白-20 热休克蛋白-22 热休克蛋白-27 磷酸化热休克蛋白27 磷酸化热休克蛋白27 磷酸化热休克蛋白27 磷酸化热休克蛋白27 三羟基三甲基辅酶A裂解酶 三羟基三甲基辅酶A还原酶 磷酸化三羟基三甲基辅酶A还原酶 三羟基三甲基辅酶A合成酶1 三羟基三甲基辅酶A合成酶2 肝细胞核因子1 肝细胞核因子4 磷酸化肝细胞核因子4 10)24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗。 上海抚生生物科技有限公司推荐其他产品信息: ?趋化素样蛋白IgG 人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP) 绿脓杆菌 ?钙激活氯离子通道4IgG 人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD) 金葡萄球菌 ?紧密连接蛋白1(C端)IgG 人吡啶交联物(PY) 细菌 ?紧密连接蛋白1IgG 人骨桥素(OPN) 绿脓杆菌 ?磷酸化紧密连接蛋白6IgG 人内皮脂肪酶(EL) 白色念球菌 ?紧密连接蛋白6IgG 人横纹肌辅肌动蛋白 (sm Actinin- ) 白色念球菌 ?接头蛋白CrkLIgG 人骨成型蛋白7(BMP-7) 微生物 ?磷酸化接头蛋白CrkLIgG 人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3) 微生物 |